精品久久人人爽天天玩人人妻,日韩免费无码一区二区视频,国产精品香港三级国产AV,中文文字乱码一二三四

免費(fèi)咨詢熱線:
15522676233
技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)中心 > 細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)原理及實(shí)驗(yàn)方法

細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)原理及實(shí)驗(yàn)方法

 更新時(shí)間:2024-10-08 點(diǎn)擊量:139

細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)是用來檢測(cè)細(xì)胞增殖能力、侵襲性、對(duì)殺傷因素敏感性等項(xiàng)目的重要技術(shù)方法。

一、實(shí)驗(yàn)原理

接種細(xì)胞后,只有同時(shí)具有貼壁和增殖活力的細(xì)胞才會(huì)形成克隆??寺⌒纬陕史从臣?xì)胞的獨(dú)立生存能力的強(qiáng)弱,用于評(píng)價(jià)細(xì)胞群體依賴性和增殖能力??寺⌒纬陕逝c接種密度有一定關(guān)系,在進(jìn)行測(cè)定時(shí)需要將接種的單個(gè)細(xì)胞分散為懸液,并直接接種在培養(yǎng)皿中進(jìn)行持續(xù)一周以上的培養(yǎng),并在此期間進(jìn)行檢查。當(dāng)出現(xiàn)新的、由單個(gè)原始生長(zhǎng)出來的完整幾何結(jié)構(gòu)時(shí),則可以停止培養(yǎng)過程。

克隆形成依據(jù)采用的培養(yǎng)介質(zhì)的不同,分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類。

二、實(shí)驗(yàn)方法

1. 平板克隆實(shí)驗(yàn)6孔板為例

1將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞胰酶消化后,wanquan培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%胎牛血清)重懸成細(xì)胞懸液,并計(jì)數(shù);

2細(xì)胞接種:于6孔板培養(yǎng)板中各實(shí)驗(yàn)組接種400-1,000個(gè)細(xì)胞/孔(根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況確定,一般為700個(gè)細(xì)胞/孔);

3繼續(xù)培養(yǎng)到14天或絕大多數(shù)單個(gè)克隆中細(xì)胞數(shù)大于50為止,中途每隔3天進(jìn)行換液并觀察細(xì)胞狀態(tài);

4克隆完成后,在顯微鏡下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拍照,然后PBS洗滌1次,每孔加入1 mL 4%多聚甲醛固定30-60 min,PBS洗滌1次;

5每孔加入結(jié)晶紫染液1ml,染細(xì)胞10-20 min;

6PBS 洗滌細(xì)胞數(shù)次,晾干,數(shù)碼相機(jī)拍照(分別對(duì)整個(gè)六孔板及每個(gè)孔進(jìn)行單獨(dú)拍照)。

2. 軟瓊脂克隆實(shí)驗(yàn)

1配制1.2% 0.7%瓊脂,高壓滅菌后,維持在42℃中使其不會(huì)凝固;

21.2% 瓊脂與培養(yǎng)基混合,鋪入6孔板作為下層膠,每孔1.5ml37°C孵育30 min使之凝固;

3將制備好的單細(xì)胞懸液與0.7%瓊脂充分混勻,加入6孔板作為上層膠,每孔1.5ml。待其凝固后,再在上面加入培養(yǎng)基,每3天更換一次;

4根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度培養(yǎng)2~3周后顯微鏡下觀察克隆大小,與平板克隆一樣,每個(gè)克隆>50個(gè)細(xì)胞,顯微鏡拍照。若拍整個(gè)孔,每孔加入200μl氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)染色,37°C過夜,拍照。

更多有關(guān)細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)原理及實(shí)驗(yàn)方法,請(qǐng)聯(lián)系細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品供應(yīng)商——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司!

百奧創(chuàng)新(無電話無二維碼).png



色欲久久综合亚洲精品蜜桃| 欧美性XXXX极品少妇| 精品国模一区二区三区| 亚洲国产精品无码专区| 被体育老师抱着C到高潮| 啊灬啊灬啊灬快灬深用力| 亚洲白嫩小受男同GV在线观看| 初尝人妻少妇中文字幕| 精品一区二区三区自拍图片区| 亚洲欧美精品午睡沙发| 亚洲AV无码乱码日韩欧美| 放荡的小峓子喂奶在线观看| 免费看高清大片的APP在线看| 天天澡天天狠天干天啪啪小说| 久久99精品久久久久久无毒不卡| 欧美大尺寸SUV欧美| 人妻熟女一二三区夜夜爱| 国产一区二区三区| 又粗又长又大真舒服好爽| 97人伦影院A级毛片| 人妻少妇久久久久久97人妻| 久久久96人妻无码精品蜜桃| 小SAO货揉揉你的奶真大视频| 亚洲最大成人网| 调教YIN荡女友系列合集| 11孩岁女精品A片BBB| 蜜桃AV色偷偷AV老熟女| 国产午夜无码精品免费看性色| 怀孕被躁到高潮的孕妇| 人妻VA精品VA欧美VA| 机机对机机的30分钟免费软件| 国产大片资源中文字幕| 免费看大片软件| 丰满少妇被猛烈高清播放| 裸体跳舞XXXX裸体跳舞| 久久久精品| 自拍偷在线精品自拍偷无码专区| 成熟丰满熟妇高潮XXXXX视频| 夜夜爽妓女8888视频免费观看| 黑人50厘米全部进去| 天堂А√在线最新版中文在线|